研究药物对肿瘤细胞行为的影响时，经常会用到细胞划痕和Transwell小室实验。来自武汉大学的任老师在Advanced Healthcare Materials杂志上发布的文章中就用到了上述实验，下文是任老师的一些经验分享。
刚开始接触划痕和Transwell小室实验会感觉步骤繁琐，但网站上有很多实验方法步骤，都非常详细，而且基本步骤都差不多，针对自己研究的肿瘤细胞可以多探索，多做几次熟练一下。
01 划痕实验
划痕实验是研究肿瘤细胞在经过药物处理后的迁移能力，其成功的关键在于细胞的状态。
在对药物处理完肿瘤细胞后，细胞再次铺板时，需要掌握好细胞的铺板密度及状态，隔天在细胞长到80-90%后，才能对细胞进行划痕，否则密度太稀或太密都会影响实验的成功。另外，采用灭菌的200 ul或10 ul枪头进行划痕时，需要根据自己实验室现有的枪头进行判断采用哪种合适。
02 Transwell小室实验
Transwell小室实验，是研究肿瘤细胞经过药物处理后的侵袭能力。
在前期小室中铺基质胶的浓度需要探索好，这也是细胞能否成功侵袭的首要步骤。铺基质胶需要在冰上操作，保证基质胶不会提前凝固，基质胶在-20℃和室温下都会发生凝固，但是4℃是液体状态，因此一定要掌握好铺胶的温度。
另外，小室膜的孔径也是细胞侵袭是否能成功的关键。8μm孔径适合大多数细胞类型，5μm孔径适合成纤维细胞或癌细胞（如NIH-3T3和MDA-MAB 231细胞）的亚群也适合单核细胞和巨噬细胞，3μm孔径适合白细胞或淋巴细胞迁移。因此，针对不同的细胞类型，需要选择适合的膜孔尺寸。
以上为任老师细胞划痕和Transwell小室实验的全部经验分享，希望能对大家有所帮助。同时也欢迎更多老师来稿，分享您的科研干货和心得体会！返回搜狐，查看更多
责任编辑：