OECD 471化学品Ames毒理试验是一种重要的遗传毒性测试,用于评估化学物质是否具有致突变性,进而可能对生物体的遗传物质造成损害。以下是该试验的详细说明:
实验原理:I89-I27O-6O73
Ames试验基于鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)的组氨酸营养缺陷型菌株,这些菌株在缺乏组氨酸的环境中不能生长,除非它们发生回复突变,恢复了合成组氨酸的能力。通过观察在化学物质处理后,菌株是否能在无组氨酸的培养基上生长,来判断该化学物质是否具有致突变性。
使用菌株
常用菌株包括TA98、TA100、TA1535、TA1537等,每种菌株对特定类型的基因突变敏感,如TA98对 frameshift 突变敏感,而TA100对点突变敏感。
测试条件
S9混合物:为了模拟体内代谢,部分测试会加入哺乳动物肝脏提取物(S9混合物),以激活潜在的代谢活化物质。
正负对照:确保实验的准确性,使用已知的致突变剂作为正对照,无活性物质作为阴性对照。
实验步骤
菌株增菌:将菌株培养至适宜浓度。
处理样品:将化学物质与菌株混合,可能包括不同浓度和S9的存在或缺失。
平板接种:将处理后的菌液接种到无组氨酸的选择性培养基上。
培养观察:在适宜条件下培养,观察并计数回复突变的菌落。
结果分析:根据菌落数量的变化判断化学物质的致突变性。
结果评价
如果处理组的回复突变菌落数显著高于对照组,且在至少一种菌株中观察到,通常认为该化学物质具有遗传毒性。
应用与意义
安全性评估:Ames试验是化学品、药品、食品添加剂等安全性评估的重要组成部分。
法规遵从:符合OECD(经济合作与发展组织)标准,是国际上广泛接受的测试方法,对于产品注册和市场准入至关重要。
研究工具:在环境毒理学、致癌性研究及药物开发中,Ames试验提供关键数据。
注意事项
结果解释需综合考虑所有菌株的反应,避免假阳性或假阴性结果。
需要与其他遗传毒性测试结合使用,以全面评估化学物质的遗传毒性风险。返回搜狐,查看更多
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