人骨髓增生异常综合征（MDS）细胞系SKM-1是一种广泛用于研究MDS及其相关治疗策略的细胞模型。SKM-1细胞系来源于日本研究生物资源细胞库，具有多种生物学特性，使其成为研究MDS的理想工具[3]。
SKM-1细胞系表现出显著的增殖抑制特性，这在多项研究中得到了验证。例如，黄芩苷（wogonin）和褐藻多糖（fucoidan）均能显著抑制SKM-1细胞的增殖，并诱导细胞凋亡[3,4]。这些化合物通过不同的机制发挥作用，如黄芩苷主要通过诱导细胞周期停滞来抑制增殖，而fucoidan则通过激活凋亡途径和产生活性氧（ROS）来抑制增殖[3,4]。
此外，SKM-1细胞系还被用于研究药物耐药性。例如，耐高三尖杉酯碱的SKM-1细胞系已被建立，并用于探讨多药耐药机制[2]。此外，SKM-1细胞系还被用于研究基因沉默和药物联合治疗的效果。例如，通过沉默SPAG6基因并使用地西他滨处理SKM-1细胞，可以观察到细胞凋亡和PTEN去甲基化的作用[7]。
在基因型和表型特征方面，SKM-1细胞系也表现出一定的异质性。例如，甲氨蝶呤敏感和耐药的SKM-1细胞系（SKM1-S和SKM1-R）在形态学上存在差异，但它们在基因型上具有相似性，这表明尽管存在形态上的变化，但基因突变模式保持一致[5]。
总之，SKM-1细胞系因其在MDS研究中的广泛应用和显著的生物学特性，成为研究MDS发病机制、药物筛选及耐药性研究的重要工具。
SKM-1细胞系在人骨髓增生异常综合征研究中的具体应用是什么？
SKM-1细胞系在人骨髓增生异常综合征（MDS）研究中的具体应用主要体现在以下几个方面：
1. 药物筛选与机制研究：SKM-1细胞系被广泛用于评估不同药物对MDS细胞的影响。例如，青蒿琥酯（ART）对SKM-1细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的作用及其相关机制的研究。此外，维奈托克隆（VEN）和阿糖胞苷（Ara-C）在SKM-1细胞中的协同效应也被研究，以探索其在MDS治疗中的潜在应用[14]。
2. 通路抑制剂研究：通过抑制MEK/ERK和PI3K/AKT信号通路，SKM-1细胞系被用于研究这些通路在MDS转化中的作用[1]。这有助于理解这些通路在疾病进展中的角色，并为开发新的治疗策略提供理论基础。
3. 耐药性机制研究：SKM-1细胞系还被用于研究药物耐药性机制。例如，从原代SKM-1 MDS/AML细胞系中产生了对阿糖胞苷（AZA）耐药的SKM-1细胞，通过形态学特征分析、电子显微镜图像、共染色和流式细胞术分析等方法，研究了耐药性细胞与敏感细胞的差异[5]。
4. 基因表达调控研究：SKM-1细胞系被用于研究特定基因在MDS中的表达调控。例如，研究了miR-378对SKM-1细胞凋亡及增殖的影响，构建了高表达miR-378的SKM-1细胞模型，以探讨其在MDS中的作用[16]。
5. 疾病进展与治疗反应研究：SKM-1细胞系也被用于研究MDS的疾病进展和治疗反应。例如，研究了青蒿琥酯对SKM-1细胞中DNMT1表达的影响，以探讨其在高危MDS细胞株中的作用[17]。
黄芩苷和褐藻多糖如何具体影响SKM-1细胞的增殖和凋亡？
黄芩苷和褐藻多糖对SKM-1细胞的增殖和凋亡影响具体如下：
黄芩苷（wogonin）在时间和剂量依赖性方式下抑制了SKM-1细胞的增殖。通过荧光显微镜观察，未处理的SKM-1细胞呈现淡蓝色荧光，而受wogonin处理的细胞显示出剂量相关的凋亡细胞比例增加，表现为更深的蓝色荧光，表明细胞发生了凋亡[3]。进一步的Annexin V/PI双染色实验显示，wogonin在SKM-1细胞中诱导了剂量依赖性的凋亡，且随着实验时间的延长，凋亡率显著增加。这表明wogonin处理导致SKM-1细胞进入G0/G1期，细胞周期蛋白表达水平发生变化，如CDK4和cyclin D1的表达减少，而p21Cip1和p27Kip1的表达增加，表明细胞周期停滞在G1/S期转换点，从而抑制细胞生长[3]。此外，wogonin处理还上调了与凋亡相关的蛋白Bax、激活的caspases 3和9以及c-PARP的表达，同时下调了抗凋亡蛋白Bcl-2的表达，进一步证实了其诱导细胞凋亡的作用[3]。
褐藻多糖（fucoidan）通过激活外源性和内源性凋亡途径，诱导SKM-1细胞凋亡。研究发现，fucoidan能增加Fas的表达，激活外源性凋亡途径，进而促进细胞凋亡[4]。此外，fucoidan还能抑制PI3K/Akt信号通路，通过激活caspase-9，进一步增强凋亡信号[4]。fucoidan还能增加细胞内ROS水平，导致细胞周期停滞和凋亡[4]。流式细胞术分析显示，fucoidan处理后，SKM-1细胞的凋亡率从16.4%显著增加到28.2%[4]。细胞周期分析显示，fucoidan处理组中G1/G0期细胞比例显著增加，而S期和G2/M期细胞比例显著减少[4]。聚合酶链反应和Western blot分析表明，fucoidan处理后，Fas、caspase-3、caspase-8和caspase-9的mRNA表达水平分别提高了0.5-3倍[4]。此外，fucoidan还抑制了PI3K/Akt信号通路，导致磷酸化Akt蛋白表达下降[4]。
黄芩苷和褐藻多糖均通过不同的机制抑制SKM-1细胞的增殖并诱导其凋亡。
SKM-1细胞系耐高三尖杉酯碱的机制是什么？
SKM-1细胞系耐高三尖杉酯碱的机制并未直接提及。然而，[19]中提到SKM-1细胞对地西他滨（DAC）的耐药性可能与hENT1基因的低表达有关[3]。这表明SKM-1细胞系可能通过降低hENT1的表达来抵抗某些药物，尽管具体到高三尖杉酯碱的耐药机制并未明确说明。
SPAG6基因沉默对SKM-1细胞凋亡和PTEN去甲基化的影响如何？
SPAG6基因沉默对SKM-1细胞凋亡和PTEN去甲基化的影响主要体现在以下几个方面：
1. 细胞凋亡：多项研究表明，SPAG6基因沉默能够显著诱导SKM-1细胞的凋亡。例如，通过慢病毒介导的SPAG6下调增加了SKM-1细胞的凋亡率[33]。此外，SPAG6基因沉默还通过AMPK/mTOR/ULK1信号通路诱导自噬，进一步促进SKM-1细胞的凋亡[21]。
2. PTEN去甲基化：有研究指出，SPAG6基因沉默能够增强地西他滨诱导的SKM-1细胞凋亡和PTEN去甲基化的作用[20]。这表明SPAG6基因沉默不仅直接诱导细胞凋亡，还可能通过影响PTEN的甲基化状态来进一步促进凋亡。
3. 自噬与凋亡的关系：SPAG6基因沉默激活了自噬过程，但自噬的激活也引起了细胞凋亡。使用自噬抑制剂3-MA和CQ阻断自噬后，发现SPAG6敲降引起的细胞凋亡显著减少[21]。这表明自噬在SPAG6基因沉默介导的SKM-1细胞凋亡中起着重要作用。
SPAG6基因沉默通过多种机制诱导SKM-1细胞凋亡，并可能通过影响PTEN的甲基化状态来进一步促进凋亡。
SKM1-S和SKM1-R细胞系在形态学和基因型上的差异及其对治疗反应的影响是什么？
SKM1-S和SKM1-R细胞系在形态学和基因型上的差异及其对治疗反应的影响主要体现在以下几个方面：
1. 形态学差异：
o SKM1-R细胞表现出较大的细胞体积，这导致了细胞倍性的增加。通过细胞周期和核型分析可以观察到这一现象 [5]。
o 细胞周期分析显示，SKM1-R细胞在G2期和M期的比例较高，而SKM1-S细胞则在S期和G1期的比例较高[5]。
2. 基因型差异：
o 尽管SKM1-S和SKM1-R细胞在基因型上存在一些相似之处，例如都携带TET2、ASXL1和TP53基因的突变，但它们在某些基因表达上有所不同。具体来说，SKM1-R细胞中存在89个最佳基因，其中80%为下调表达，20%为上调表达[5]。
o SNP阵列分析显示，SKM1-R细胞的基因组存在多个SNP变异，而SKM1-S细胞则没有这些变异[5]。
3. 对治疗反应的影响：
o SKM1-R细胞对阿扎胞苷（AZA）具有抗性，而SKM1-S细胞则对AZA敏感[5]。
o 在基因表达分析中，SKM1-R细胞中上调了与细胞运动、细胞死亡和存活相关的基因[5]，同时下调了与细胞间信号传导和自由基清除相关的基因。这些变化可能解释了SKM1-R细胞对AZA的抗性机制。
SKM1-S和SKM1-R细胞系在形态学和基因型上的差异显著，并且这些差异影响了它们对治疗药物AZA的反应。
参考文献：
1. MEK/ERK and PI3K/AKT pathway inhibitors affect the transformation of myelodysplastic syndrome into acute myeloid leukemia via H3K27me3 methylases and de‑methylases. [PMID: 37921060]
2. 耐高三尖杉酯碱人SKM-1细胞系的建立及其生物学特性观察 [J] . 中华血液学杂志,2012,33( 06 ): 433-438.
3. Wogonin inhibits the proliferation of myelodysplastic syndrome cells through the induction of cell cycle arrest and apoptosis. [PMID: 26398525]
4. Fucoidan inhibits proliferation of the SKM-1 acute myeloid leukaemia cell line via the activation of apoptotic pathways and production of reactive oxygen species. [PMID: 26324225]
5. Phenotypic and genotypic characterization of azacitidine-sensitive and resistant SKM1 myeloid cell lines. [PMID: 24962689]
6. WEE1 and PARP-1 play critical roles in myelodysplastic syndrome and acute myeloid leukemia treatment. [PMID: 37370065]
7. SPAG6基因沉默和地西他滨对SKM-1细胞凋亡和PTEN甲基化的影响 [J] . 中华血液学杂志, 2021, 42(12) : 1005-1010.
8. Methylation level of Rap1GAP and the clinical significance in MDS. [ PMID: 30546468]
9. 骨髓增生异常综合征发病机制及预后研究进展 [J] . 白血病·淋巴瘤, 2019, 28(3) : 129-131.
10. BIIB021对MDS细胞株Skm-1增殖的多靶点抑制作用研究. [作者：李静 · 2017]
11. Bmi-1基因及其编码蛋白在SKM-1细胞系中的表达[J]. 肿瘤防治研究, 2006, 31(02):
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12. 骨髓增生异常综合征最新研究进展 [J] . 白血病·淋巴瘤, 2016, 25(7) : 441-444. DOI: 10.
13. Functional study of hENT1 on SKM-1 cell resistance to decitabine. [PMID: 26031529]
14. Glutathione promotes the synergistic effects of venetoclax and azacytidine against myelodysplastic syndrome‑refractory anemia by regulating the cell cycle. [PMID: 38023359]
15. Effect of Artesunate on Proliferation, Cell Cycle and Apoptosis of SKM-1 Cells and Its Underlying Mechanisms. [PMID: 26913409]
16. miR-378 inhibits cell growth and enhances apoptosis in human myelodysplastic syndromes.[ PMID: 27633496]
17. 青蒿琥酯对高危MDS细胞株SKM-1中DNMT1表达的影响[J]. 河北医科大学学报
18. Fucoidan inhibits proliferation of the SKM-1 acute myeloid leukaemia cell line via the activation of apoptotic pathways and production of reactive oxygen species. [PMID: 26324225]
19. SKM-1细胞地西他滨耐药机制中hENT1功能的研究 [J] . 中华血液学杂志, 2015, 36(5) : 408-412.
20. Effects of SPAG6 silencing and decitabine treatment on apoptosis and phosphatase and tensin homolog methylation in SKM-1 cells. [PMID: 35045671]
21. SPAG6 silencing induces autophagic cell death in SKM-1 cells via the AMPK/mTOR/ULK1 signaling pathway. [PMID: 32537026]
22. MiR-143 regulates proliferation and apoptosis of SKM-1 cells in vitro by inhibiting AF9 [J]. Journal of Third Military Medical University, 2018, 40(20): 1826-1832. [PMID: 30132510]返回搜狐，查看更多
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