“生命银行”中到底有些什么?医学资料是如何收集和保存的?近日,记者走进广州市第十二人民医院穗港英分子流行病学研究室,跟踪了从问卷调查到抽血,从血样处理到进入液态氮罐储存的整个过程。其中,“加工”一份血液样本就需要十几道工序。
【准备】
问卷细到“吃辣”程度
3月5日上午,记者在分子流行病学研究室外的房间里,看到来自尊老康乐协会的老人们正在接受问卷调查。每位受访者都将先接受一份长达55页的问卷调查。这些调查除个人背景信息、个人病史和家族病史外,还细致到吸烟史、喝酒、喝茶、饮食习惯,体力活动状况,被动吸烟与室内空气污染,精神记忆力和睡眠情况,女性生育史、物理体检等,共有十三个部分。整个问卷大约要花一个小时。
研究人员告诉记者,如此细致全面科学的问卷调查,在国内很少见。而且,这份调查问卷的设计引入了社会心理范畴的问题,比如“在您的家庭成员和朋友中,是否有人在您遇到困难时能够交流谈心”等……专家认为,人生中心理上遭遇的打击与健康也可能存在某种关联,因此,设计这些问题也是为了进行前瞻性研究。
记者看到,在问到受访者饮食习惯时,甚至细致到喜欢吃辣的程度,并分出“微辣、较辣、很辣”。
问卷结束后,医护人员还将为老人进行血压、心电图、X线胸片、肺功能等检查,并抽取18ml的血样(其中8ml在体检时即进行血常规、血生化检查,余下10ml经处理后储存在液态氮中,用于将来做基因等方面的分析)。
调查结束后,医院将主要体检结果,包括实验室血常规、乙肝两对半和生化26项等提供给本人,由个人保存。市十二医院江院长告诉记者,对首期一万名受访者,医院各项检查不仅全部免费,而且检查出有病需要治疗时,病人也可以自己选择医院进行治疗。
项目组成员朱彤医生“入行”已经15年,原本是广州市呼吸疾病研究所一员的她,因为觉得生物库这个项目“非常具有前景”,欣然加入,并成为实验室筹备的“元老”之一。
【制作】
每月处理千份样本
朱彤告诉记者,处理血液样本的实验室目前共有5名工作人员。这5个人每天要把采集到的45份血液样本,经过十几道工序的加工,处理成“合格”的产品,存放进液态氮罐中。“我们的计划是一个月处理1000份样本。这项工作一点马虎不得,因为储存起来的样本,是要在5年、10年后拿出来做研究用的。”
“去年8月,实验室正式开始运作,前三个月里每天加班到七八点钟是很正常的事。”朱彤介绍说,因为国内几乎没有建立液态氮生物库的经验,所有的技术标准和操作程序,都是一步步摸索出来的。
最后每位被调查者的血液样本都会被处理成两份分别为1.5ml的血浆和白细胞,而基因信息就在白细胞中。这些保存下来的样本,在超低温的条件下可以长时间保持细胞活性,成为5—10年后科学研究的珍贵资料。“生命银行”的通俗称法,也大致源出于此。
“分离白细胞需要非常复杂的科研方法,我们现在却要实现大批量的运作,困难正在于此。”
血液样本制作流程
在朱彤医生的带领下,记者进入实验室中,首先映入眼帘的就是两个大柜子。“所有的操作都是在P2级的生物安全柜下无菌的进行,这是最首要的一点。”朱彤介绍说。
分离细胞和血浆
装在真空采血管中的血液样本经过初步离心后,分离出血浆和细胞(包括白细胞和红细胞等)两部分。在抽出血浆后,剩下的细胞还要进行更复杂的工序,以分离出“含有基因信息的白细胞”。
分离白细胞
在记者看来,分离白细胞的过程显然相当复杂。研究人员首先要用真空采血管把稀释后的细胞,缓缓注入到一支装有透明试剂的试管内。朱彤告诉记者,这种叫做FICOLL的试剂是从国外进口的,一瓶要700多元人民币,用来分离白细胞,实验室每天起码要消耗一瓶。
接下来,这支试管要放到eppendorf台式低温高速离心机中进行30分钟的再次离心。30分钟后,取出的试管已经分离出了三个不同的层次。“你看,这支分离得真‘漂亮’!”朱彤指着其中一支试管开心地说,“我们需要的是中间薄薄的一层白细胞。所以操作的时候,又得非常小心才行。”在两层液体中,抽取中间一层不到0.5厘米高度的白细胞,在记者看来简直像“绣花”。
还没完呢。取出的白细胞,因为还混有离心试剂、稀释液等杂质,必须用一种平衡盐洗涤三次,保证把所有残留的东西去掉。然后,还要给细胞加入一份细胞冻存保护液,避免细胞一下子进入超低温环境破裂。
试管降温
“完成后的试管,还得进行严密的程控降温,基本上每分钟1摄氏度的速度,梯度降温到零下80摄氏度。一周之内再转存到液态氮库零下196摄氏度的环境中。”朱彤告诉记者,每次开液态氮罐,都会造成氮的损失,所以每周才开一次。
入库保存
每位受访者的血液样本都有一张特定的条形码,就像身份证号码一样,以避免混淆。“这种条形码也是国外进口的,能够保证在超低温环境下使用。”朱彤介绍说。每个液态氮罐可存放约7万支试管,每个研究对象的样本分装4支试管,分成两份储存到不同的液态氮罐中,以备将来分析。
“血液样本总共要经过十几道的技术工序,这还不包括管理工序,才能入库保存。”朱彤说。
作者:记者严慧芳 石磊 通讯员杨萍
转自搜狐
|