消毒、取样、注水、静养，这样娇贵的培养对象，却是现在人人喊打的“荧光猪肉”元凶族类荧光假单胞菌。12月20日，信报记者与青岛大学生物系联手实验发现，荧光假单胞菌有点“娇生惯养”，30摄氏度是理想的繁殖环境，4摄氏度时它们会停止繁殖。青岛大学生物系主任李荣贵还在荧光假单胞菌的营养液中培育黑松幼苗，结果5天之内黑松幼苗全部枯萎致死。
实验一 24小时揪出“荧光猪肉”元凶族类 “要想研究‘荧光猪肉’的元凶，就得把荧光假单胞菌分离出来。”12月20日，青岛大学生物系主任李荣贵介绍说，“我们在实验室有保留的细菌样本，样本都是在低温下保存的。”记者了解到，大量繁殖荧光假单胞菌，需要消毒、取样、注水、静养，一系列的过程都需要在密闭的无菌空间中进行，细菌生长也要无菌，非常娇贵。
上午10点左右，实验前，所有的实验材料被放入工作台紫外灭菌20分钟。20分钟后，实验室工作人员关掉紫外灯，将封闭的工作台打开，进入实验台后，双手用酒精棉擦拭，并点燃酒精灯，开始对直接接触细菌样品的器具进行消毒。降温后，工作人员用器具深入样品试管，把细菌“接”出来。“在此之前，需要在一个小容器中住满无菌液体，‘接’出来的细菌会被转移到这个放满无菌液体的小容器中。”工作人员解释说。
记者看到，“娇生惯养”的细菌被“接”到无菌液体中后，工作人员拿起一个类似圆珠笔的器具开始对无菌液体反复地吸入喷出，“要让细菌样品在无菌液中分散开，繁殖起来才比较快。”工作人员介绍说。“荧光假单胞菌的生长繁殖需要比较严格的生活环境，如果在4摄氏度的时候，细菌可以存活，但生长和繁殖会停止。”工作人员介绍说，“最理想的繁殖生长环境，就是在无菌的条件下，温度调节在30摄氏度左右。”
“接下来，就要吸取150微升的菌悬液滴于培养基表面，用加热灭菌的涂布棒将菌悬液均匀地涂布在培养基表面。”专业词语不断地从实验人员嘴里蹦出来，记者连连摇头。实验人员连忙给记者解释：“菌悬液就是那小瓶从刚刚加入细菌的一毫升无菌水，涂布棒是头上一个三角形的玻璃棒，培养基就是平底的玻璃器皿。”
“明天上午10点左右，我们就可以在这个玻璃器皿中看到一点一点抱团的满杯细菌了。”工作人员解释说，“从显微镜下看，荧光假单胞菌是柱状结构，后面会看到几个丝状的‘尾巴’。”
实验结论“荧光猪肉”元凶族类很“脆弱” 12月20日，记者在青岛大学生物系采访到系主任李荣贵。他告诉记者：“就荧光假单胞菌来说，它分为不同的株，也就是不同的种类，我们研究的是荧光假单胞菌GcM5-1A，目前已知的有四五种左右，这些菌种的外形都差不多，但是对于植物、动物影响的程度却是不一样的。”
“荧光假单胞菌属于嗜冷菌，喜欢在冷的环境下生存，这也就意味着，高温状态下这种菌就很容易被杀死。”李荣贵说，“但是有研究发现，在北美很少发现因为荧光假单胞菌诱发的植物死亡案例，这是因为荧光假单胞菌需要借植物体内的线虫来生存繁殖，如果温度过低，细菌赖以生存的线虫被冻死了，那么细菌也就自然而然被杀死了。”
“现在人们热议的‘荧光猪肉’，同样在高温下也会杀死荧光假单胞菌，一般来说，水温达到70摄氏度，细菌就不会存活了。”李荣贵说。
实验二 放入“荧光猪肉细菌”，黑松幼苗死了 随后，记者等人还用“荧光猪肉细菌”做了黑松幼苗实验。“我很多学生都做过黑松实验，主要是来验证荧光假单胞菌在黑松感染松萎蔫病中起到的作用。”李荣贵说，之所以选取荧光假单胞菌作为实验对象，是因为有实验对造成黑松感染松萎蔫病的线虫进行过分析，在线虫身体表面的多种细菌中，荧光假单胞菌对黑松死亡过程中产生的影响最大。
“有实验曾经直接给黑松注射过荧光假单胞菌，但是并没有直接导致黑松的死亡。”李荣贵分析说，“也就是说，细菌并不能自己对树木产生威胁，而是在植物一种线虫的作用下，双方协作，最终导致的黑松死亡。”
青岛大学生物系学生不止一次地做过黑松死亡的实验，“我们把八株黑松幼苗分别放入不同剂量的清水和荧光假单胞菌液体中，观察黑松的生长状态。”李荣贵解释说，“这个实验需要把黑松的根部解掉，让整个幼苗充分吸收清水或者荧光假单胞菌液体，这样就可以实现细菌和植物体内线虫的协调配合，让一些幼苗感染松萎蔫病。”
“多组实验表明，插入清水的黑松幼苗五天后生长状态良好，毫无枯萎的迹象，而插入荧光假单胞菌液体中的黑松幼苗，一天天开始枯萎，五天后全部枯萎死亡。”李荣贵介绍说。
实验结论荧光假单胞菌会释放致病毒素 “我们现在研究的主要课题就是松萎蔫病，这种疾病是由松材线虫和其携带的致病细菌共同侵入松树，在松材线虫提供保护和营养的条件下，由致病细菌分泌毒素导致寄主萎蔫和死亡。松材线虫在携带细菌入侵及入侵后能为其提供营养和保护作用，而细菌在产毒和促进线虫繁殖等方面起重要作用。”李荣贵介绍说。
李荣贵得出结论，“经过我们多年的研究，课题组已从松材线虫携带的一株高致病性荧光假单胞菌GcM5-1A的培养液中分离了两种对黑松悬浮培养细胞和黑松切根苗均有明显致死活性的物质，并通过实验在发病的黑松枝条内检测到了这两种化合物的存在。”
实验手记人体也有荧光假单胞菌尚未发现对人的负面影响 “目前来说，并没有发现荧光假单胞菌对人会产生什么样的负面影响，因为在人的痰、肠道中都可以分解出荧光假单胞菌。”青岛大学生物系主任李荣贵介绍说，“但是并不能绝对地说就没有影响，从严格意义上来讲，荧光假单胞菌是一种机会性致病菌，这种机会性致病菌的意思也就是说，在一定的条件下，和一些细菌或者物质作用中，会产生一些不利的影响。”
记者看到实验室工作人员在实验前后都用消毒液对手进行消毒，考虑到的也是这种因素。“在荧光假单胞菌对动物的影响方面，一些专家也进行过研究，比方说辽宁省淡水水产科学研究院曾经对鲤鱼竖鳞病的病原进行过研究。”
“他们在患有竖鳞病鲤鱼的鳞囊、肝、肾中分离出病原菌3株，对其中2株进行分类鉴定，分离自病鱼鳞囊的菌株为鲶爱德华氏菌，分离自病鱼肾脏的菌株为荧光假单胞菌。”青岛大学生物系主任李荣贵介绍说。 文/图 记者 郭振亮
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